SAMENVATTING EN UITLEG VAN DE TEST
Viscerale leishmaniasis, of Kala-azar, is een verspreide infectie veroorzaakt door verschillende ondersoorten van de L. donovani.De Wereldgezondheidsorganisatie (WHO) schat dat de ziekte ongeveer 12 miljoen mensen in 88 landen treft.Het wordt op mensen overgedragen door beten van de Phlebotomus-zandvliegen, die besmet raken door zich te voeden met geïnfecteerde dieren.Hoewel het een ziekte is die voorkomt in arme landen, is het in Zuid-Europa de belangrijkste opportunistische infectie onder AIDS-patiënten geworden.Identificatie van het L. donovani-organisme uit het bloed, beenmerg, lever, lymfeklieren of de milt biedt een definitief diagnosemiddel.Serologische detectie van anti-L.donovani IgM blijkt een uitstekende marker te zijn voor de acute viscerale leishmaniasis.Tests die in de kliniek worden gebruikt, zijn onder meer ELISA-, fluorescente antilichaam- of directe agglutinatietests 4-5.Onlangs heeft het gebruik van L. donovani-specifiek eiwit in de test de gevoeligheid en specificiteit dramatisch verbeterd.
De Leishmania IgG/IgM Combo Rapid Test is een op recombinant eiwit gebaseerde serologische test, die gelijktijdig IgG- en IgM-antilichamen tegen L. Donovani detecteert.De test geeft zonder instrumenten binnen 15 minuten een betrouwbaar resultaat.
BEGINSEL
De Leishmania IgG/IgM-sneltest is een laterale flowchromatografische immunoassay.De testcassette bestaat uit: 1) een bordeauxrood conjugaatkussentje dat recombinant L. donovani-antigeen bevat, geconjugeerd met colloïdgoud (Leishmania-conjugaten) en konijnen-IgG-goudconjugaten, 2) een nitrocellulosemembraanstrip met twee testbanden (T1- en T2-banden) en een controleband (C-band).De T1-band is vooraf gecoat met monoklonaal anti-humaan IgM voor de detectie van anti-L.donovani IgM, T2-band is vooraf gecoat met reagentia voor de detectie van anti-L.donovani IgG, en de C-band is vooraf bekleed met geit-anti-konijnen-IgG.
Wanneer een voldoende hoeveelheid testmonster in het monsterputje van de cassette wordt gedoseerd, migreert het monster door capillaire werking door de cassette.Het IgM van L. donovani, indien aanwezig in het monster, zal zich binden aan de Leishmania-conjugaten.Het immunocomplex wordt vervolgens op het membraan gevangen door het vooraf beklede anti-menselijke IgM-antilichaam, waardoor een bordeauxrode T1-band wordt gevormd, wat wijst op een L. donovani IgM-positief testresultaat.Het IgG van L. donovani, indien aanwezig in het monster, zal zich binden aan de Leishmania-conjugaten.Het immunocomplex wordt vervolgens opgevangen door de vooraf gecoate reagentia op het membraan, waardoor een bordeauxrode T2-band wordt gevormd, wat wijst op een L. donovani IgG-positief testresultaat.
Het ontbreken van enige T-banden (T1 en T2) duidt op een negatief resultaat.De test bevat een interne controle (C-band) die een bordeauxrode band van het immunocomplex van geit-anti-konijn-IgG/konijn-IgG-goud-conjugaat moet vertonen, ongeacht de kleurontwikkeling op een van de T-banden.Anders is het testresultaat ongeldig en moet het monster opnieuw worden getest met een ander apparaat.
