SAMENVATTING EN UITLEG DE TEST
Malaria is een door muggen overgedragen, hemolytische, met koorts gepaard gaande ziekte die meer dan 200 miljoen mensen infecteert en meer dan 1 miljoen mensen per jaar doodt.Het wordt veroorzaakt door vier soorten Plasmodium: P. falciparum, P. vivax, P. ovale en P. malariae.Deze plasmodia infecteren en vernietigen allemaal menselijke erytrocyten en veroorzaken koude rillingen, koorts, bloedarmoede en splenomegalie.P. falciparum veroorzaakt een ernstiger ziekte dan de andere plasmodiale soorten en is verantwoordelijk voor de meeste sterfgevallen door malaria, en het is een van de twee meest voorkomende malariapathogenen.
Traditioneel wordt malaria gediagnosticeerd door het aantonen van de organismen op met Giemsa gekleurde dikke uitstrijkjes van perifeer bloed, en de verschillende soorten plasmodium onderscheiden zich door hun verschijning in geïnfecteerde erytrocyten.De techniek is in staat tot een nauwkeurige en betrouwbare diagnose, maar alleen als deze wordt uitgevoerd door bekwame microscopisten met behulp van gedefinieerde protocollen, wat grote obstakels vormt voor de afgelegen en arme delen van de wereld.
Om deze obstakels op te lossen is de Pf Ag Rapid Test ontwikkeld.Het detecteert het Pf-specifieke antigeen pHRP-II in menselijk bloedmonster.Het kan worden uitgevoerd door ongetraind of minimaal geschoold personeel, zonder laboratoriumapparatuur.
BEGINSEL
De Pf Ag Rapid Test is een laterale flow chromatografische immunoassay.De componenten van de teststrip bestaan uit: 1) een bordeauxrood conjugaatkussentje met monoklonaal anti-pHRP-II-antilichaam geconjugeerd met colloïdgoud (pHRP II-goudconjugaten), 2) een nitrocellulosemembraanstrip met een testband (Pf) en een controleband (C-band).De Pf-band is vooraf bekleed met polyklonale anti-pHRP-II-antilichamen en de C-band is vooraf bekleed met geiten-antimuis-IgG.
Tijdens de assay wordt een adequaat volume van het bloedmonster afgegeven in de monsterholte (S) van de testcassette, een lysisbuffer wordt toegevoegd aan de bufferholte (B).De buffer bevat een detergens dat de rode bloedcellen lyseert en het pHRPII-antigeen vrijgeeft, dat door capillaire werking over de strip in de cassette migreert.pHRP-II zal, indien aanwezig in het monster, binden aan de pHRP II-goudconjugaten.Het immunocomplex wordt vervolgens op het membraan gevangen door de vooraf gecoate polyklonale anti-pHRP II-antilichamen, waardoor een bordeauxrode Pf-band wordt gevormd, wat wijst op een Pf-positief testresultaat.
Afwezigheid van de Pf-band duidt op een negatief resultaat.De test bevat een interne controle (C-band) die een bordeauxrode band van het immunocomplex van geit-antimuis-IgG / muis-IgG (pHRP II-goudconjugaten) moet vertonen, ongeacht de kleurontwikkeling op een van de Pf-banden.Anders is het testresultaat ongeldig en moet het monster opnieuw worden getest met een ander apparaat.