SAMENVATTING EN UITLEG DE TEST
Malaria is een door muggen overgedragen, hemolytische, met koorts gepaard gaande ziekte die meer dan 200 miljoen mensen infecteert en meer dan 1 miljoen mensen per jaar doodt.Het wordt veroorzaakt door vier soorten Plasmodium: P. falciparum, P. vivax, P. ovale en P. malariae.Deze plasmodia infecteren en vernietigen allemaal menselijke erytrocyten en veroorzaken koude rillingen, koorts, bloedarmoede en splenomegalie.P. falciparum veroorzaakt een ernstiger ziekte dan de andere plasmodiale soorten en is verantwoordelijk voor de meeste sterfgevallen door malaria.P. falciparum en P. vivax zijn de meest voorkomende pathogenen, maar er is een aanzienlijke geografische variatie in de verspreiding van soorten.
Traditioneel wordt malaria gediagnosticeerd door het aantonen van de organismen op met Giemsa gekleurde dikke uitstrijkjes van perifeer bloed, en de verschillende soorten plasmodium onderscheiden zich door hun verschijning in geïnfecteerde erytrocyten.De techniek is in staat tot een nauwkeurige en betrouwbare diagnose, maar alleen als deze wordt uitgevoerd door bekwame microscopisten met behulp van gedefinieerde protocollen, wat grote obstakels vormt voor de afgelegen en arme delen van de wereld.
Om deze obstakels op te lossen is de Malaria Pf/Pv Ag Sneltest ontwikkeld.Het maakt gebruik van antilichamen die specifiek zijn voor P. falciparum Histidine Rich Protein-II (pHRP-II) en voor P. vivax Lactaatdehydrogenase (Pv-LDH) om gelijktijdig infectie met P. falciparum en P. vivax te detecteren en te differentiëren.De test kan worden uitgevoerd door ongetraind of minimaal geschoold personeel, zonder laboratoriumapparatuur
BEGINSEL
De Malaria Pf/Pv Ag Rapid Test is een laterale flow chromatografische immunoassay.De componenten van de striptest bestaan uit: 1) een bordeauxrood conjugaatkussentje met muis-anti-Pv-LDH-antilichaam geconjugeerd met colloïdgoud (Pv-LDH-goudconjugaat) en muis-anti-pHRP-II-antilichaam geconjugeerd met colloïdgoud (pHRP-II-goudconjugaat), 2) een nitrocellulosemembraanstrip met twee testbanden (Pv- en Pf-banden) en een controleband (C-band).De Pv-band is vooraf gecoat met een ander muis-anti-Pv-LDH-specifiek antilichaam voor de detectie van Pv-infectie, de Pf-band is vooraf gecoat met polyklonale anti-pHRP-II-antilichamen voor de detectie van Pf-infectie en de C-band is gecoat met geiten-antimuis-IgG.
Tijdens de assay wordt een adequaat volume van het bloedmonster afgegeven in de monsterholte (S) van de testcassette, een lysisbuffer wordt toegevoegd aan de bufferholte (B).De buffer bevat een detergens dat de rode bloedcellen lyseert en verschillende antigenen afgeeft, die door capillaire werking over de strip in de cassette migreren.Pv-LDH, indien aanwezig in het monster, zal binden aan de Pv-LDH-goudconjugaten.Het immunocomplex wordt vervolgens op het membraan gevangen door het voorgecoate anti-Pv-LDH-antilichaam, waardoor een bordeauxrode Pv-band wordt gevormd, wat wijst op een Pv-positief testresultaat.Als alternatief zal pHRP-II, indien aanwezig in het monster, binden aan de pHRP-II-goudconjugaten.Het immunocomplex wordt vervolgens op het membraan gevangen door de vooraf gecoate anti-pHRP-II-antilichamen, waardoor een bordeauxrode Pf-band wordt gevormd, wat wijst op een Pf-positief testresultaat.Afwezigheid van testbanden duidt op een negatief resultaat.De test bevat een interne controle (C-band) die een bordeauxrode band van het immunocomplex van geit-antimuis-IgG / muis-IgG (anti-Pv-LDH en anti-pHRPII)-goudconjugaten moet vertonen, ongeacht de kleurontwikkeling op een van de testbanden.Anders is het testresultaat ongeldig en moet het monster opnieuw worden getest met een ander apparaat.
